Tuberkuloosi PCR-diagnoos lastel ja täiskasvanutel: näidustused

Köha

Maailma Tervishoiuorganisatsioon tunnistas 20 aastat tagasi, et tuberkuloosi leviku määr oli kontrolli all ja jõudis epideemia ulatuseni. Sellest ajast peale ei ole olukord paranenud. Igal aastal diagnoositakse rohkem kui miljon haigusjuhtu, millest peaaegu veerand on surmaga lõppenud. Viimase kümne aasta jooksul on laste esinemissagedus suurenenud, enamik haiguse vorme ei sobi antibiootikumide standardravi jaoks.

Tänapäeval on üks meditsiinilistest globaalsetest ülesannetest selliste diagnostiliste meetodite väljatöötamine, mis võimaldavad tuvastada patoloogiat enne väljendunud kliiniliste sümptomite ilmnemist. Üks neist on tuberkuloosi polümeraasi ahelreaktsioon (PCR), mis aitab tuvastada Kochi haigust põhjustavaid pulgad veres, röga ja muudes bioloogilistes vedelikes.

Tuberkuloosi diagnoos

Sõelumistestide eesmärk on avastada patsiente, tuberkuloosi kandjaid ja ennetada nakkuse levikut ühiskonnas. Alla 14-aastastele lastele kasutatakse massiivselt Mantoux'i testi. See on immunoloogiline test, milles tuberkuliini annust süstitakse subkutaanselt - mitut tüüpi mükobakterite geneetilise materjali kompleksne segu. Spetsiaalse reaktsiooni ilmnemine näitab aktiivselt esinevat nakkuslikku protsessi.

Ennetuslikuks uurimiseks täiskasvanutel, kasutades fluorograafiat või röntgenikiirgust. Need meetodid aitavad visualiseerida kopsukoe patoloogilisi kahjustusi. Siiski tekitab see raskusi tuberkuloosi eristamisel teisest orgaanilisest patoloogiast (pahaloomulised ja healoomulised kasvajad, põletikulised protsessid, parasiitide sissetungid, professionaalne kopsukahjustus).

Patoloogilise fookuse struktuuri ja suuruse selgitamiseks võib vaja minna täiendavaid instrumentaalseid uuringuid:

  • suunatud radiograafia;
  • kompuutertomograafia;
  • magnetresonantstomograafia.

Tuberkuloosi diagnoosimise meetodid

Kahtlaste tulemuste ja piisava ravi määramiseks on vaja täpsemaid diagnostilisi meetodeid, mis võimaldavad patogeeni isoleerida. Tuberkuloosi pulmonaarsete vormide kinnitamiseks kasutatakse pika aja mikroskoopilist ja bakterioloogilist uurimist.

Viimastel aastatel on mitmesuguste elundite ja süsteemide - neerude, luude, soolte, naha - esinemissagedus muutunud sagedasemaks. Tuberkuloosi nende vormide tuvastamiseks võib kasutada ultraheliuuringuid, uriini ja väljaheite kultuuri, endoskoopilisi uuringuid.

Tuberkuloosi PCR-i diagnostika aitab kinnitada Kochi pulgade olemasolu veres, samuti selle tundlikkust teatud ravimite suhtes. See on väga tõhus meetod, mis põhineb bakteriaalse geneetilise materjali avastamisel mitmesugustes bioloogilistes vedelikes.

Spetsiifilisus ja tähised

Polümeraasi ahelreaktsioon on väga tundlik mikrobioloogiline diagnostiline meetod, mis põhineb geenitehnoloogia põhimõtetel. Patogeeni olemasolu kinnitamiseks bioloogilises materjalis piisab selle jaoks unikaalse nukleiinhappe fragmendi tuvastamisest. Tuberkuloosi PCR võib tuvastada vere, röga, uriini baktereid.

Hetkel on välja töötatud mitu analüüsimeetodit. Kõige populaarsem neist on järgmised:

  • Reaalaja PCR;
  • mikrofluidiline tehnoloogia;
  • sekveneerimine ja püroseerumine.

Reaalaja PCR

Laborid kasutavad kõige sagedamini reaalajas polümeraasi ahelreaktsiooni, kuna see vähendab valepositiivsete tulemuste arvu ja analüüsiprotsess ise võtab lühikese aja.

Arvestades haiguse peidetud vormide suurt arvu ja standardsete diagnostikameetodite ebaefektiivsust, kasutatakse üha enam PCR-i. Selle analüüsi eesmärk on näidatud aadressil:

  • röntgenkiirte kahtlaste alade kindlakstegemine;
  • kahtlaste tuberkuliinitestide tulemused;
  • tõsise seisundiga inimeste röga mikroskoopilise ja bakterioloogilise analüüsi teostamise võimatus;
  • kirurgiliste sekkumiste läbiviimine, kui on vaja kiiresti tagada nakkuse puudumine;
  • fluorograafia, röntgenkiirte või kompuutertomograafia kasutamise lubamatus (nt rasedatel ja rinnaga toitvatel lastel, kiirgusdoosi ületamise korral);
  • kahtlustatakse ekstrapulmonaalset tuberkuloosi (on soovitatav kasutada mitte ainult verd, vaid ka limaskesta).

Tuberkuloosi PCR-diagnostika on tõestanud end laste uurimisel täiendava ekspositsiooni ja kiirete tulemuste puudumise tõttu.

Ettevalmistus ja analüüs

Eriline preparaat vere PCR-i jaoks ei ole vajalik. Vereproovide tüsistuste vältimiseks ja kvaliteetse materjali saamiseks tuleb järgida järgmisi üldreegleid:

  • analüüs tuleb teha hommikul mitte varem kui 2 tundi pärast ärkamist;
  • See peaks piirama rasvaste ja praetud toiduainete tarbimist päev enne vereproovide võtmist;
  • hoiduda 8-9 tunni jooksul söömisest, teest ja kohvist, on lubatud juua puhast vett;
  • Mitte suitsetada vähemalt 3-4 tundi.

Püsivate ravimite (hormoonid, antikoagulandid, põletikuvastased ravimid, antibiootikumid, vere vedeldid) puhul peate sellest teavitama laboratoorset assistenti.

Röga kohaletoimetamisel peate hambad hästi harjatama ja suu mitu korda loputama. Koguge materjal steriilsesse anumasse. Paremate tulemuste saamiseks võib õhtul võtta röga- või mukolüütilist ainet.

Diagnoos ise koosneb mitmest etapist.

    Aia materjal. Seda saab teha laboris ja eemalt. Mõned materjalitüübid, mida patsient ise kogub (uriin, flegma).

Nukleiinhapete struktuuri hävitamine (DNA ja RNA molekulide denatureerimine). Selleks kuumutatakse katsematerjali 98 kraadi temperatuurini ja hoitakse mitu minutit. Selle tulemusena kahekordse heeliksi lahti kerkib, moodustuvad üheahelalised molekulid.

  • Hõõrdumine Pärast praimeri lisamist (lühike nukleiinhappe osa) langeb temperatuur mitu kraadi, aktiveerub polümeraas.
  • Tuvastus. Temperatuur saavutatakse optimaalsele tasemele, ensüümi aktiivsus jõuab maksimaalse tasemeni ja teine ​​ahel viiakse lõpule vastavalt Chargaffi komplementaarsuse reeglile.

    • Uuringu lõpuleviimiseks on vaja sünteesida vajalik arv DNA molekule - umbes 50 tsükli ülaltoodud reaktsiooni. See võtab aega umbes 2-3 tundi. Reaktsiooni positiivne tulemus ei näita alati haiguse aktiivset etappi, vaid näitab mikroorganismi olemasolu organismis.

    Meetodi eelised ja puudused

    Võrreldes teiste mikrobioloogiliste meetoditega, ei võta PCR-iga PCR-iga PCR-iga PCR-iga PCR-i abil pikka aega aega, tulemust on võimalik saada testimise päeval.

    Teiseks eeliseks on analüüsi kõrge spetsiifilisus, mis võimaldab tuvastada patogeeni olemasolu 90-95% täpsusega peaaegu igas biomaterjalis (veri, uriin, väljaheited, tserebrospinaalvedelik, röga, bronhide lopetus).

    Meetodi puhul on siiski mitmeid puudusi:

    • üsna kõrge valepositiivsete tulemuste protsent (kuni 15%), mis on seotud elusate mikroorganismide avastamisega;
    • mõnel juhul võite haiguse tõrjumise vahele jätta, sest Mycobacterium tuberculosis'e suhtes rakendatakse sageli mutatsioone ja nende geneetilisi materjale;
    • immuunpuudulikkusega inimeste uurimise madal efektiivsus;
    • kõrgete hindadega, vajadus kalli varustuse ja reaktiivide järele.

    Mida saab asendada?

    Arvestades tuberkuloosi nakkuse erinevaid vorme, täpsemat diagnoosi ja ravi valikut, on vaja kombineerida mitmeid diagnostilisi uuringuid:

      Laste kohustuslik analüüs on Mantoux'i test. Kui tuberkuliini (mükobakterite geneetiline materjal) sissetoomine ilmneb selgelt, võib eeldada, et see nakatub tuberkuliiniga.

    Patoloogilise fookuse visualiseerimiseks võib kasutada röntgenmeetodeid. Ekstrapulmonaalse tuberkuloosi diagnoosimisel kasutatakse samaaegse biopsiaga endoskoopilisi meetodeid:

    • bronhoskoopia aitab tuvastada kõri, hingetoru, bronhide kahjustusi;
    • kolonoskoopia - sooled;
    • tsüsteetroskoopia - kuseteede organid;
    • hüsteroskoopia - naiste suguelundid. Need meetodid ei ole spetsiifilised, täpseks diagnoosimiseks tuleb tuvastada patogeen.

    Üldised kliinilised testid aitavad keha seisundit täpsemalt kindlaks määrata. Vajalik on täielik vereloome leukotsüütide valemiga.

    Vähendatud lümfotsüütide taseme neutrofiilide arvu suurenemine ja erütrotsüütide sadestumiskiiruse (ESR) suurenemine näitab bakteriaalse etioloogia aktiivset põletikulist protsessi. Vältida kuseteede organite kahjustusi, kasutades üldist uriinianalüüsi ja steriilsuse kultuuri.

    PCR on praegu saadaval enamikes erasektorites. See nõuab mitte ainult kõrgelt kvalifitseeritud spetsialiste, vaid ka kalleid seadmeid, suurt hulka reaktiive. Seetõttu on selle meetodi kasutamine piiratud, hoolimata selle suurest täpsusest ja spetsiifilisusest.

    Tuberkuloosi PCR analüüs

    Haiguse kahtluse korral on parem tuberkuloosi PCR-analüüs kohe läbi viia. Selle uuringu käigus võetakse verd, mida kontrollitakse mikroskoobi all. Polümeeri ahelreaktsioon hakkas üha rohkem asendama Mantoux'i testi tuberkuloosi avastamiseks.

    Meetodi eelised

    See analüüs mõne tunni pärast määrab patogeeni olemasolu. Lisaks sellele, kui kehas on väike kogus baktereid, on see meetod endiselt võimeline neid identifitseerima.

    PCR-testi peamised eelised on järgmised positiivsed punktid:

    1. Haigus avastatakse 100% juhtudest.
    2. Ameti DNA eripära on kõrge.
    3. Analüüsist selgub, et haigusetekitaja on 4-4,5 tundi.
    4. Kopsu tuberkuloosi diagnoositakse edukalt, millega teised meetodid ei suuda toime tulla.
    5. Võime tuvastada spetsiifilist fragmenti, mis sisaldub selles patogeenis.

    Polümeeri ahelreaktsioon võimaldab mitte ainult tuvastada haigust põhjustavat ainet õigeaegselt ja alustada patsiendi ravi, vaid võimaldab ka aega isiksuse eraldamiseks ühiskonnast nakkuse korral. Kochi võlukepp - tuberkuloosi põhjustaja - võib leida kõikjal kehas. Ja ainult PCR-analüüs võimaldab seda asukohta tuvastada.

    PCR-uuring annab ka võimaluse valida ravim sõltuvalt mikroorganismide tundlikkusest.

    Haiguse kirjeldus

    19. sajandil nimetati tuberkuloosi tarbimiseks. Haigus on siseorganite, peamiselt kopsude nakkus. Tuberkuloosi levib õhu kaudu aevastamine ja köha. Nakkuse objektiks võib olla nii inimene kui ka loom.

    Pärast tuberkuloosi bakterite tungimist kehasse võib haigus varjatud kujul kesta pikka aega.

    Olenevalt haigestunud isiku teistest kokkupuute määrast eristatakse kahte haiguse vormi:

    1. Tuberkuloosi suletud vorm. See ei ole ohtlik, sest inimene ei saa teisi nakatada. Isegi analüüsides, sh. ja PCR, mükobakterite haigusi ei avastata. Kuid siiski on see oht selles vormis olemas igal ajal võib suletud vorm avada. Selline tuberkuloosi aktiivne vorm võib olla ohtlik mitte ainult patsiendile, vaid ka neile, kes teda ümbritsevad.
    2. Avatud infektsiooni vorm. Kui see on inimese bioloogilistes vedelikes, avastatakse Kochi kepp. Patsient, kellel on selles staadiumis tuberkuloos, ohustab teda ümbritsevaid inimesi. Sa võid nakatuda isegi siis, kui vedaja jälgib hoolikalt hügieeni suhtes.

    Kõige tavalisemad haiguse tuvastamiseks kasutatavad uurimismeetodid on:

    1. Fluorograafia.
    2. Rinna või teiste kahjustatud piirkondade tomograafia.
    3. Radiograafiline uuring.
    4. Patsiendi bioloogiliste materjalide uurimine.
    5. Tuberkuliinitest (Mantoux).

    Kõige efektiivsemad viisid Koch bacilluse identifitseerimiseks on polümeraasi ahelreaktsiooni molekulaarne geneetiline analüüs - tuberkuloosi PCR-diagnoos.

    Tuberkuloosi uurimine

    Polümeraasi ahelreaktsioon on kõige täpsem molekulaarne geneetiline analüüs. Kui on esinenud tuberkuloosi infektsiooniga nakatumine, võimaldab uuringu polümeeri test täpselt tuvastada patogeeni DNA või RNA. Selleks annetage verd või muud bioloogilist vedelikku.

    Tuberkuloosi esinemise kindlakstegemiseks piisab minimaalsest kogusest bakteritest, isegi 1 rakk.

    PCR-i diagnostika muud eelised on järgmised:

    1. Selle analüüsi läbiviimisel kasutatakse spetsiaalset ensüümi, mille tõttu tuvastatakse tuberkuloosi nakkuse täpne esinemine.
    2. PCR analüüs on eriti tundlik mükobakterite nakkuste suhtes, seega on diagnostiline täpsus võrdne peaaegu 100% -ga.
    3. Juba pärast 3,5-5,5 tundi pärast katse läbiviimist on võimalik teada katsetulemusi.

    Sellise haiguse nagu tuberkuloosiga on väga oluline tuvastada patoloogia selle varases staadiumis. Seetõttu on polümeraasi ahelreaktsiooni testimine antud juhul kõige informatiivsem. Kui bakterid hakkavad rünnama, tuleb neid avastada võimalikult varakult, kuni nende toime on mõjutanud siseorganite elulisi funktsioone.

    PCR-analüüsil on teine ​​eelis teiste uuringutega võrreldes: tehnika määrab mikroorganismide tundlikkuse konkreetse ravimi suhtes, mis võimaldab ravi kõige efektiivsemalt.

    PCR testimise ettevalmistamine

    Sülje andmisel tuleb selleks ette valmistada. 12 tundi enne protseduuri peate loobuma suitsetamisest, alkoholist, ravimitest ja toidust. Hammaste harjamine, suu loputamine erinevate värskendajatega ja isegi hambaniit on keelatud. Samuti ei saa te kasutada huulepulka ja elavat seksuaalelu. Suuõõne tuleb loputada keedetud veega.

    PCR meetodil ei avastata mitte ainult tuberkuloosi. Samamoodi ei ole võimalik tuvastada vähem tõsiseid haigusi, nagu herpes, klamüüdia, mononukleoos, kopsupõletik, barolleoos, HIV, hepatiit, punetised.

    Kõige sagedamini võetakse verd veest, kuid mõnel juhul võib osutuda vajalikuks täiesti erinev bioloogiline materjal:

    1. Sülg.
    2. Uriini analüüs
    3. Kraapimine mis tahes kehaosast.
    4. Seksuaalne sekretsioon.
    5. Cal.
    6. Seljaaju vedelik.
    7. Flegma bronhide ajal röstimise ajal.
    8. Lima analüüs.

    PCR-i kõige informatiivsem meetod on siiski tuberkuloosi vereanalüüs.

    Biomaterjali kogumine

    Hoolimata asjaolust, et patogeeni identifitseerimise protseduur PCR meetodil võtab aega vaid 4-4,5 tundi, on see kõige raskemate diagnoosiliikide hulgas. Mitmed tegurid võivad tulemuste täpsust mõjutada. Näiteks on vaja koguda uuringute jaoks proove vastavalt teatud reeglitele. Peamine on bioloogilise materjali kogumise suurenenud steriilsus. Seetõttu on see analüüs väikese lapse läbiviimiseks keeruline.

    Kui proov võetakse veenina verest, siis teeb spetsialist vereproovi tuberkuloosi PCR-iga mitte ainult steriilses süstlas, vaid vastavalt kõigile üldhügieenieeskirjadele.

    Vere kogutakse spetsiaalsesse katseklaasi ja kogu uuringu jooksul säilitatakse sellised tingimused, mis takistavad selle hüübimist.

    Kui see on tuberkuloosi uriini PCR-analüüs, kogutakse vedelik varahommikul, kui inimene on ärkvel. Enne tualetti minekut võtab patsient duši ja võtab seejärel steriilse konteineri uriini kogumiseks.

    Nii naiste kui ka meeste genitaalide kraapimise korral viiakse kogu protseduur läbi meditsiiniasutuses.

    On keerulisemaid teste, nagu näiteks seljaaju vedeliku võtmine. Sel juhul teostavad kõik tegevused haiglas kogenud arstid.

    Enamasti määratakse polümeeri ahelreaktsiooni analüüsi läbimine sellistel juhtudel:

    1. Haiguse diagnoosimiseks kopsukoes.
    2. Haiguse allika kindlakstegemiseks.
    3. Haiguse väljaselgitamine väljaspool kopse.
    4. Haiguse kordumise diagnoosimiseks.

    Katse järjestus

    Tuberkuloosi diagnoosimine lastel ja täiskasvanutel polümeeri ahelreaktsiooni abil toimub järgmiselt:

    1. Teatud olukordades võetakse uurimiseks erinevaid materjale. See võib olla veri, röga või bronhide pesemine.
    2. Pärast seda puutub bioloogiline materjal teatud aja jooksul kokku kõrge temperatuuriga (kuni + 97 ° C) (kõige sagedamini on see mitu minutit). Selle tulemusena hävitatakse 2 ahelast koosneva mikroorganismi DNA algne struktuur.
    3. Pärast seda hakkab temperatuur langema, seda tegevust nimetatakse lõõmutamiseks. Praegusel ajal ühendab krunt 1 eraldatud ahelaga.
    4. Pikenduse lõpus viiakse läbi. Selle käigus toimub olemasolevate molekulide vajalik bioloogiline süntees.

    Mycobacterium tuberculosis'e DNA vajaliku arvu koopiate saamiseks kulub 25-30 tsüklit.

    Menetlus nõuab kulukaid seadmeid, nii et kõigil meditsiiniasutustel ei ole Mantoux'i asemel võimalik teostada tuberkuloosi PCR-testi.

    Tänu vaktsineerimisele ja PCR-uuringutele (Mantoux'i asemel) on võimalik vältida sellise ohtliku haiguse, nagu tuberkuloos, teket. Nüüd ei pea te ootama haiguse algust ega pildistama röntgeniseadmega. Kui esineb infektsiooni kahtlusi, on haiguse kohutavate tagajärgede kõrvaldamiseks alati võimalik teha PCR-test, mis määrab keha seisundi maksimaalse täpsusega. Reaalajas on sellised diagnostilised vormid nagu Mantoux'i test ja fluorograafia järk-järgult fooniks, võrreldes PCR-meetodiga.

    Tuberkuloosi röga testimise meetodid

    Tuberkuloosi röga analüüs sisaldub diagnostikameetmete kogumis, mis on vajalik diagnoosi tuvastamiseks ja selgitamiseks. Röga sisaldus aitab luua pädeva raviskeemi.

    Kuidas läbida tuberkuloosi röga test

    Arstid on välja töötanud reeglid analüüsi tegemiseks. Sülg kogutakse hommikul, enne kui isik on hommikusööki saanud. Esiteks täidab patsient hügieeniprotseduure:

    • hambaemailide puhastamine;
    • põhjalik loputamine suuõõne ja neelu puhta veega.

    Seejärel algab analüüsimiseks materjali kohene tarnimine. Kuidas läbida röga test? Menetluse nõuded:

    1. Ettevalmistus algab õhtul ette. Patsienti julgustatakse võtma spetsiaalseid ravimeid, mis muudavad pulmonaalse sekretsiooni loomulikumaks. Need on röstimis- ja harvendusühendid. Kui sellised protseduurid ei aita, teostage inhaleerimine ravimkompositsiooniga, mis on ette nähtud röstimiseks.
    2. Valmistage röga mahutid. Lima tuleb koguda steriliseeritud nõudesse, sulgedes tihedalt, tihedalt.
    3. Enne kohaletoimetamist köha ja sülita mahutisse. Sülje maht ei tohiks olla suur, see nõuab kõri välja röga. Suuõõne bakterid on analüüsis kõrvalised.
    4. Koguda sülg suurepärase ventilatsiooniga ruumis. Analüüs viiakse läbi avausega, avades kapuutsi. Soovitatav on aknad avada või värske õhu kätte minna.

    Menetluse ajal on toas keelatud siseneda. Välised isikud võivad kaasa aidata büroo mikrofloorale ja seega röga, patoloogiliste vormide juurde. Meditsiinitöötajad saavad analüüsi spetsiaalse maskiga (respiraator).

    Tuberkuloosi transkripti röga analüüs

    Dekodeerimine algab lima välimuse vaatamisega. Patoloogia iseloomustab värvimuutust - see muutub tumedaks, nähtavate veresegudega. Värv ei ole peamine näitaja. Pähkel muutub tumedaks punase veini joomist, kohvi kirg. Mõned ravimid ja värvilised joogid muudavad lima välimust.

    Kogutud materjali dešifreerib kaks näitajat, st arstid saavad kaks tulemust:

    Positiivne vastus

    Saadud röga analüüs kinnitab haiguse esinemist organismis. Mis kinnitab seda:

    • võõrkehad või tundmatud lisandid;
    • limaskestade esinemine;
    • nähtavad triibud;
    • ebameeldiv mädane või nakkuslik lõhn;
    • mäda.

    Makroskoopiline uurimismeetod pakub muid andmeid:

    • fibriinsed konvulsioonid;
    • Kochi läätsepleki kihid;
    • bakterite lagunemisest tulenevad tooted;
    • kopsukoe patoloogilise protsessi jäänused.

    Positiivne tulemus näitab valguühendite suurenenud kogust. See jõuab 100-120 g / l.

    Teine mikroskoopiline meetod võimaldab tuvastada teisi ohtlikke elemente:

    • alveolaarsed makrofaagid;
    • leukotsüütide ülehindamine;
    • lümfotsüütide kõrge sisaldus.

    Tuberkuloosi puhul püüab inimene sageli suust välja sülitada. Hemoptüüs suurendab punaste vereliblede moodustumist. Sülje maht suus on selline, et inimene ei suuda seda ilma märkamata neelata. See on rohkem kui tervislikus seisundis.

    Negatiivne vastus

    Uuring näitab, et leukotsüütide arv on väike, vastab normile. Mikrobaktereid ei avastata. Kui patsient ei tunne end tervena, määrab spetsialist täiendava uuringu. On võimalik, et haigus on seotud kopsuhaigusega. Täiendava diagnostika tüübid ja meetodid sõltuvad patsiendi sümptomitest ja seisundist.

    Kuidas on lima uuring

    Tuberkuloos on kopsukoele ohtlik patoloogiline toime, täheldatakse nende lagunemist. Analüüs viiakse läbi mitme meetodi abil. Kõige tavalisem - ELISA (immunoanalüüs). Meetodi olemus:

    1. Antikehad lisatakse lahusele, kuhu on paigutatud röga osa.
    2. Kontrollige antigeenide kontsentratsiooni võrreldes terve keha normiga.
    3. Määrake patoloogilise keskkonna aktiivsus.
    4. Diagnoosige.

    Laboriuuringute teine ​​versioon on JÄÄTMED. Meetodi jaoks võtke spetsiaalne meditsiinitehnika. Riistvara uurimise olemus:

    1. Röga süstitavas mikrokeskkonnas ettenähtud infektsiooni tüübi jaoks.
    2. Seade hakkab kasvama teatud temperatuuri tüvedes.
    3. Protsessis tekib süsinikdioksiid ja andurid võtavad selle vastu.
    4. Gaas ühendab värvi.
    5. Fluorestsentsindeksi kohta tehakse järeldused haiguse tüübi kohta.

    Lihtsaim viis on kultuuriline. Flegm külvatakse spetsiaalses keskkonnas. Arst uurib mikroobide moodustumise kolooniate liike. Meetod on pikim, kuid võimaldab teil diagnoosi tõestada. Seda kasutatakse väga harva, just pika aja jooksul, mis ei ole alati patsiendile sobiv.

    Tuberkuloosi röga PCR analüüs

    PCR on meditsiinilise termini polümeraasi ahelreaktsiooni lühend. Diagnostika on teadlaste üks viimaseid arenguid. See avati 1983. aastal, avastamise tähtsust hinnatakse maailmas, teadlane sai kõrgeima tunnustuse - Nobeli preemia.

    Meetod põhineb geenitehnoloogia kasutamisel. Selle mitmekülgsus väikeses koguses materjali täpseks diagnoosimiseks. Tuvastage tuberkuloosi nakatumine on tõesti nakatumise algusaegadel, ilma haiguse tekkimist ootamata.

    Polümeraasi meetodi olemus:

    • patsient võtab DNA osakeste fragmenti;
    • teostada materjali bioloogilist sünteesi;
    • määratakse mikroorganismide klassi järgi.

    Protsess on tehnoloogiliselt keeruline, see hõlmab molekulaarset geneetilist uurimist. Tuberkuloosi PCR võtab sõna-sõnalt paar tundi. Teiste meetodite jaoks vajalikku aega ei saa temaga kiirelt võrrelda. Pärast analüüsi läbimist ootab patsient haigustekitaja avastamist. Mõista saab ainult spetsialisti aluseks olevat protsessi. Tavaline inimene ei mõista meetodi keerukust.

    Kuidas on tuberkuloosi testide diagnoos:

    1. Tehke analüüsiks vajalik materjal. Mis see võiks olla: veri, kõht, röga, vesi, pesta bronhidega.
    2. Materjali tüüp valitakse sõltuvalt patogeeni võimaliku nakkuse tüübist.
    3. Järgmine samm on ahelaühenduse uurimine. Kaks ahelat läbivad kõrge temperatuuri kuni 98 kraadi. Etappi nimetatakse denaturatsiooniks (struktuurse DNA ahela hävitamine). Temperatuuri säriaeg - kuni 2 minutit.
    4. Järgmine etapp on lõõmutamine. Temperatuuri vähendatakse, praimeril lubatakse ühenduda DNA ahelaga.
    5. Selle tulemusena tekib pikenemine - protsessi jaoks vajalike molekulide süntees.

    Sellise analüüsi jaoks on vaja spetsiaalset varustust. See on kallis, nii et see ei ole üheski tervishoiuasutuses kättesaadav. PCR viiakse läbi rasketel juhtudel, kui tavapäraste diagnostikameetodite täpset tulemust ei ole, ei ole võimalik läbi viia instrumentaalseid meetodeid patsiendi seisundi kontrollimiseks.

    PCR tehnoloogia eelised:

    1. Tulemuse saavutamise kiirus. Umbes 5 tundi on arstil täpsed andmed. See kiirus võimaldab teil patsienti hädaolukorras aidata. Sagedamini on see preoperatiivne periood.
    2. Lubatud, kui teisi meetodeid ei saa kasutada. Näiteks viib röntgenikiirte sagedane kordamine kiirgusele. PCR ei ole patsiendile ohtlik.
    3. Võite uurida mis tahes bioloogilist keskkonda. On tuvastatud isegi keerulised tuberkuloosi vormid.
    4. Seega on meetod turvaline lastele.
    5. Nakkus tuvastatakse igal etapil.
    6. PCR ei võimalda varjata isegi väikest arvu baktereid.
    7. Sobib tuberkuloosi võimaliku kordumise kontrollimiseks.

    Kui palju tuberkuloosi röga analüüs

    Proovid võetakse rohkem kui üks kord. Kordused välistavad vigade võimalikkuse või halva kvaliteediga materjali saamise, mis ei kajasta patsiendi tegelikku asendit ja seisundit. Kui mitu korda röga koguda, rääkige sellest arstile. Parim valik on kolm korda päevas. Mõnikord võib vaja minna täiendavaid proove. Mis aja jooksul nad koguvad:

    1. Enne söömist hommikul.
    2. 3-4 tundi pärast esimest katset.
    3. Teisel päeval, ka enne sööki.

    Tuberkuloos on ohtlik haigus, mis võib mõjutada iga inimese keha. On palju infektsiooni olukordi. Kui teil on kahtlus nakkuse võimalikkuse suhtes, ärge oodake eredaid sümptomeid. Ravi alustamiseks tuleb seda testida, uurida ja aega.

    Tuberkuloosi PCR-diagnoos

    Tuberkuloos on spetsiifiline nakkus, selle fookus võib olla inimkudedes juba aastaid ja seejärel mitme kuu jooksul. See on krooniline haigus, mille optimaalne ravirežiim on raske valida. Selle üheks põhjuseks on hiline diagnoosimine, kui mükobakterid on inimorganismis juba paljude ravimitega kohanenud.

    Millised on kaasaegsed diagnoosimeetodid? PCR diagnostika - mis see on? Kuidas see uurimus tehakse? Millistel juhtudel on selle meetodiga diagnoositud tuberkuloos ja milline on selle olemus?

    Mis on PCR diagnostika

    See on üks kaasaegsemaid meetodeid mitte ainult haiguste, vaid ka bioloogilise materjali avastamiseks. PCR diagnostika leiutati suhteliselt hiljuti. Umbes 30 aastat tagasi 1983. aastal pakkus Ameerika biokeemik Carey Banks Mullis välja ühe lühikese segmendi mikroorganismide bioloogilise materjali kompleksse taastamiskava. Tänu avastusele pälvis teadlane kõrgeima auhinna - Nobeli preemia.

    Mis see on - nakkuste PCR-diagnoos? Polümeraasi ahelreaktsioon (PCR) on viirushaiguste avastamise diagnoos, mis põhineb geenitehnoloogia meetoditel. Seda kasutatakse laialdaselt meditsiinilise mikrobioloogia, immunoloogia ja viroloogia valdkonnas. Meetod on universaalne ja aitab teha diagnoosi väikese koguse materjaliga. Infektsiooni võib sõna otseses mõttes tuvastada esimestel nakatumise tundidel kaua enne haiguse esimeste sümptomite ilmnemist.

    Meetod seisneb haige inimeselt materjali saamises mitte patogeenis, vaid genoomi fragmentides (DNA osakesed), selle biosünteesis ja sellele järgneva määramisega, milline mikroorganismide klass on saadud geneetilise materjali molekulide geneetiliste meetodite abil.

    Hoolimata asjaolust, et see on keeruline protsess, kulub palju vähem aega kui paljud bioloogilised meetodid nakkusetekitajate avastamiseks. Mõne tunni jooksul võib mikroorganismi PCR abil tuvastada. Selleks ei ole vaja seda keskkonnast eraldada (veri, tserebrospinaalvedelik, röga) ja kasvatada seda pikka aega kunstlikel toitainetel. Piisab, et uuritava materjali juures on nakkusetekitaja DNA ahela väike fragment.

    Reaktsiooni aluseks on kunstlikes tingimustes (in vitro) võimalus nakkusetekitaja nukleiinhappemolekulide sünteesi loomiseks.

    Mida on vaja PCRi jaoks?

    1. Krundid on DNA segmendid, millest algab biosüntees või loomine.
    2. Nukleotiidid või komplekssed ühendid, mis on DNA või RNA molekuli aluseks.
    3. Polümeraasi ahelreaktsioon on polümeraasi olemasolu korral võimatu, mis on PCR-i kiirendav ensüüm.

    PCR-diagnostika etapid

    Kuidas toimub molekulaarne diagnoos PCR abil? Menetlus on lihtne ja võtab aega, võttes arvesse materjali kogumist.

    1. Enne uuringu alustamist võtavad nad vajaliku bioloogilise materjali - see on bronhide pesuvesi, veri, mao sisu, röga. Bioloogilise materjali tüüp sõltub kahtlustatavatest patogeenidest.
    2. Kahest ahelast koosneva DNA esmase struktuuri denaturatsioon või hävimine. Selle etapi põhieesmärk on eraldada kaks ahelat kõrge temperatuuri mõjul (maksimum on 98 ° C, mis kestab mitte rohkem kui kaks minutit).
    3. PCR järgmises etapis, mida nimetatakse anniilimiseks, vähendatakse temperatuuri mitu kraadi, nii et praimer seondub DNA ahelaga.
    4. Pikenemine, mille jooksul toimub soovitud molekulide süntees otse.

    Selle tulemusena saavad ainult 25–30 sellist tsüklit vajaliku arvu koopiaid mikroorganismi DNA-st, mida on lihtne ära tunda.

    Kas PCR nõuab tuberkuloosi diagnoosi?

    PCR-i ei ole võimalik teostada absoluutselt kõikidel inimestel, kellel on kahtlustatav tuberkuloos, kuna see meetod nõuab kalleid seadmeid. Mitte kõik avalikud kliinikud ei saa seda endale lubada. Lisaks juhtus nii, et tavalised meetodid nakkuse diagnoosimiseks enamikul juhtudel õigustavad ka ennast.

    Nende hulka kuuluvad:

    • patsiendiuuring, ajaloo võtmine;
    • isiku täielik läbivaatus;
    • Mantoux tuberkuliiniproovi kasutades;
    • radiograafia või fluorograafia;
    • vajadusel arvuti diagnostika;
    • mikrobioloogiliste uuringute meetodid: mustri mikroskoopia ja röga bakterioloogiline uurimine.

    Tuberkuloosi PCR viiakse läbi erijuhtudel, kui on raske diagnoosida või muid instrumentaalseid meetodeid ei ole võimalik teostada.

    Vaatamata diagnostiliste meetodite rohkusele kasvab tuberkuloosi esinemissagedus jätkuvalt. Praegu ei ole mitte ainult kasv, vaid ka muud omadused:

    • haigus esineb sageli raskes vormis;
    • surmaga lõppenud juhtude arv suureneb;
    • haiguse diagnoositud vormid on üha resistentsemad tänapäevase keemiaravi suhtes.

    Inimeste vastumeelsus igal aastal läbi viia tavapäraseid arstlikke läbivaatusi, vaktsineerimise tagasilükkamine viib tuberkuloosi levikuni. Sellistes tingimustes on vaja kiireid, informatiivseid ja tõhusaid uurimismeetodeid, mis peaksid olema kättesaadavad lastele ja täiskasvanutele. Kõik ülaltoodud diagnostikameetodid on palju halvemad kui PCR.

    Tuberkuloosi diagnoosimise eelised PCR-iga

    See uuring, kuigi uus, on end hästi tõestanud, eriti vastuolulistel juhtudel, kus on mitmel põhjusel võimatu diagnoosida.

    Tänu PCR-ile on katsematerjalis tuberkuloosi põhjustaja tuvastamine palju lihtsam.

    PCR-i diagnostika eelised on järgmised.

    1. See on kiire analüüs. DNA molekuli väikest fragmenti saab kasutada vaid mõne tunni (umbes viie) tunni jooksul diagnoosimiseks, mida kasutatakse hädaolukordades edukalt, kui näiteks enne operatsiooni on vaja kindlaks teha, kas inimene on haigestunud tuberkuloosiga.
    2. PCR-analüüs on lubatud juhul, kui teised meetodid ei ole kättesaadavad või keelatud (kopsu tuberkuloosi avastamiseks tuleb mõnikord võtta mitu radiograafilist pilti, mis on suur kiirgusdoos).
    3. PCR abil uuritakse mistahes bioloogilist keskkonda patogeeni olemasolu selles. Näiteks võite teha uuringuid tserebrospinaalvedeliku kohta, kui kahtlustatakse tuberkuloosse meningiidi tekkimist.
    4. Laste nakkushaiguste lubatud PCR-diagnoos, sest meetod on ohutu.
    5. Võimaldab tuvastada patogeeni haiguse mis tahes staadiumis.
    6. PCR kõrge tundlikkus võimaldab tuvastada Mycobacterium tuberculosis, isegi kui bioloogilises materjalis on vaid mõned mikroorganismid.
    7. Haiguse kordumise diagnoosimiseks on hea teha.

    Lõppude lõpuks tundub lugenud PCR peaaegu täiuslik diagnostiline meetod, mis peaks tegema kõikidele tuberkuloosi kahtluse. Kuid siin on ka puudusi, neid tuleb arvesse võtta.

    PCRi puudused tuberkuloosi diagnoosimisel

    Meie aja jooksul on selline diagnostika tavalisest harvem. Ja selleks on põhjus.

    1. See on kallis uurimismeetod. Paljudes kliinikutes puuduvad PCR-i seadmed selle kõrge maksumuse tõttu, kuid analüüse saab veel teha tasulistes laborites.
    2. Vahetult pärast töötlemist võivad inimkehas olla surnud mükobakterid või väikeses koguses elamine (tulemus on positiivne PCR-diagnostika ajal), mistõttu meetod ei ole sel ajal usaldusväärne, seda ei ole mõistlik seda teha.
    3. Mükobakterite mutatsioonid põhjustavad ebaefektiivset PCR-i - normaalset DNA ahela järjestust ei ole võimalik sünteesida.
    4. Uuringu jaoks on vaja valida õige keskkond, verd võetakse ainult siis, kui kahtlustatakse nakatumist (sepsis), närvisüsteemi organite tuberkuloosi korral ei ole vaja rögaid võtta. Sellisel juhul ei suuda PCR patogeeni tuvastada ja diagnoos on informatiivne.

    Indikaatorid tuberkuloosi tuvastamiseks PCR analüüsi abil

    Tuberkuloosi PCR-diagnoosimine toimub kõige sagedamini vastuolulistel juhtudel. Millal suunavad arstid selle uuringu?

    1. Kui diagnoosi on raske teha tavapäraste olemasolevate meetodite abil, kuid tuberkuloosiga patsiendil oli kokkupuude.
    2. Juhul, kui isikut ei saa kliinikusse tuberkuloosi rutiinsete katsete tegemiseks üle anda, on teda kergem uurida PCR-i abil, sest testi röga võib toimuda purki ja diagnoos kinnitatakse mõne tunni jooksul.
    3. Kui inimesel on hädaabioperatsioon ja on hädavajalik teada saada, kas ta on haigestunud tuberkuloosiga.
    4. Vajadusel on rasedatel ka PCR-i abil paremini uurida tuberkuloosi, sest meetod on ohutu.
    5. Tasulisel alusel on igaüks, kellel ei ole diagnoositud tuberkuloosi, kinnitatud bakterioloogiliste meetodite ja fluoroskoopia abil. See juhtub siis, kui kopsudes esinev kahjustus ei ole otseses pildis nähtav ning uuringu jaoks röga väljaandmisel ei suutnud inimene järgida materjali õige kogumise soovitusi. Sel juhul on inimene mures kõikide kopsutuberkuloosile iseloomulike sümptomite pärast.
    6. Kui on kahtlusi Mantoux'i testi tulemuste suhtes.
    7. Lastel on soovitatav teha tuberkuloosi PCR-diagnoos. Protseduur on ohutu, ei tekita täiendavat kiirgusega kokkupuutumist ja on efektiivne haiguse diagnoosimiseks raske.

    Tuberkuloosi õigeaegne diagnoosimine on võtmeks nõuetekohaselt määratud ravile ja haiguse leviku vähendamisele. Sageli ei ole tuttavad haiguse tuvastamise meetodid alati tõhusad. Seetõttu on PCR tänapäeval üks kõige usaldusväärsemaid ja ohutumaid viise nakkuse avastamiseks selle arengu varases staadiumis.

    PCR analüüs

    PCR (polümeraasi ahelreaktsioon) on kõige kiirem ja kõige usaldusväärsem meetod nakkushaiguste diagnoosimiseks.

    Polüeraasi ahelreaktsiooni meetodi põhimõte töötati välja Kary Mullis poolt 1983. aastal. Tema avastamiseks sai K. Mullis 1993. aastal Nobeli keemia auhinna.

    PCR meetod võimaldab teatud nukleiinhappe fragmentide (DNA) väikeste kontsentratsioonide olulist suurenemist bioloogilises materjalis (proovis). Meetod põhineb teatava DNA osa mitmekordsel selektiivsel kopeerimisel (amplifitseerimisel), kasutades ensüüme kunstlikes tingimustes.

    PCR-i diagnostilise meetodi eelised nakkushaiguste diagnostiliseks meetodiks

    Patogeenide otsene avastamine

    Paljud traditsioonilised diagnostikameetodid, nagu ensüümi immunoanalüüs, tuvastavad nakkusetekitajate elutähtsate aktiivsustena leiduvaid valgu markereid, mis annab ainult kaudseid tõendeid nakkuse esinemise kohta. Patogeeni spetsiifilise DNA piirkonna tuvastamine PCR meetodil annab otsese viite patogeeni olemasolu kohta.

    Kõrge spetsiifilisus

    PCR meetodi kõrge spetsiifilisus on tingitud asjaolust, et uuritavast materjalist tuvastatakse ainulaadne DNA fragment. Spetsiifilisust määrab praimerite nukleotiidjärjestus, mis välistab valede tulemuste saamise võimaluse, erinevalt immunoloogilistest analüüsimeetoditest, kus ristsiduvate antigeenidega seotud vead on sagedased.

    Suur tundlikkus

    PCR meetod võimaldab tuvastada isegi üksikuid bakterite või viiruste rakke. PCR analüüs näitab nakkushaiguste patogeenide esinemist juhtudel, kui teised meetodid (immunoloogilised, bakterioloogilised, mikroskoopilised) ei suuda seda teha. PCR analüüsi tundlikkus on 10-100 rakku proovi kohta (immunoloogiliste ja mikroskoopiliste testide tundlikkus on 103-105 rakku).

    Erinevate patogeenide avastamise menetluse universaalsus

    Uuringu materjal PCR abil on patogeeni DNA. Meetod põhineb konkreetse organismi suhtes spetsiifilise DNA fragmendi või RNA avastamisel. Kõigi nukleiinhapete keemilise koostise sarnasus võimaldab kasutada ühtseid laboriuuringute meetodeid. See võimaldab diagnoosida mitut patogeeni ühest biotestist.

    Kõrge analüüsitulemus

    PCR analüüsi jaoks ei ole vaja patogeeni kultuuri eraldamist ja kultiveerimist, mis võtab palju aega. Ühendatud meetod biomaterjali töötlemiseks ja reaktsioonisaaduste tuvastamiseks ning amplifitseerimisprotsessi automatiseerimiseks võimaldavad teostada täielikku analüüsi 4-5 tunni jooksul.

    Võime diagnoosida mitte ainult ägedaid, vaid ka varjatud infektsioone

    PCR meetod on eriti efektiivne raskesti kultiveeritavate, kultiveerimata ja püsivate mikroorganismide vormide diagnoosimiseks, mis sageli esinevad latentsetes ja kroonilistes infektsioonides, kuna see meetod väldib selliste mikroorganismide kasvatamisega seotud raskusi laboris. PCR diagnostika kasutamine on samuti väga tõhus kõrge antigeense varieeruvuse ja rakusiseste parasiitide patogeenide vastu.

    Kui tõhus on tuberkuloosi röga testimine PCR abil?

    Koch-pulgade identifitseerimiseks inimestel kasutatakse erinevaid diagnostilisi meetodeid. Tänu temale võib patoloogiat avastada isegi algstaadiumis, mis suurendab patsiendi taastumise võimalusi. Tuberkuloosi röga analüüs on tehnika, mida hinnatakse kõige paremini ja on üsna tõhus. Mis see on ja kui palju see hind läheb?

    Mis on röga analüüs PCR-iga?

    PCR tähistab polümeraasi ahelreaktsiooni. See meetod on tõhus nakkushaiguste vastu. Selge diagnoosi kindlakstegemiseks ei pea te koguma suurt hulka biomaterjale ja ootama pikka aega, nagu röga külvamise puhul.

    Meetod põhineb mikroorganismiosakeste DNA saamisel. Lisaks määrab molekulaarne geneetiline uurimine, millised mikroorganismid peaksid sisaldama kättesaadavat materjali. Katseklaasi tingimustes sünteesib spetsialist bakterimolekulid ja teeb asjakohased järeldused mõne tunni pärast.

    Tõhusus

    Mycobacterium tuberculosis'e röga analüüs on efektiivne, kui Kochi võlukepp on tabanud hingamisteid. Sel juhul saab haigust kergesti tuvastada isegi nakatamise esimestel tundidel.

    Kuid röga analüüs ei näita usaldusväärset tulemust, kui tuberkuloos on olemas:

    • luud;
    • aju, seljaaju;
    • närvisüsteem;
    • liigesed jne

    Ftisiatroloog suudab määrata haiguse tüübi, võttes arvesse praeguseid sümptomeid ja tuginedes üldiste ja muude analüüside tulemustele.

    Sellise uurimismeetodi puhul ei sobi ka juhul, kui peate pärast haiguse terapeutilist ravi läbi viima kontrollanalüüsi. Tulemus on positiivne, nagu kehas, igal juhul on veel elav või surnud IBC. Parem on eelistada teist diagnostilist protseduuri.

    Meetodi vastunäidustused

    Seega ei ole tuberkuloosi röga testimiseks vastunäidustusi, kasutades PCR-i. On piiranguid. Nagu eespool mainitud, ei ole seda vaja pärast tuberkuloosi ravi läbi viia. Tulemused ei ole kasulikud. Siin on soovitav kasutada erinevat diagnoosi.

    Lisaks ei ole selle diagnoosi jaoks muid takistusi. Röga võib uurida igas vanuserühmas ja sellega seotud haiguste korral. Isegi kui röga vabanemist ei toimu, võib analüüsi teha lima kasutades bronhoskoopiat.

    Kasu

    Selles meetodis on plusside mass need:

    1. Suur spetsiifilisus ja tundlikkus. Avastatakse ainult tuberkuloosi põhjustaja. Kui kõik protseduuri nüansid on arvesse võetud, ei saa olla vale vastust. Mükobaktereid avastatakse isegi siis, kui nende minimaalne arv on. Isegi kui kogutud materjalis on 10 ebanormaalset rakku, avastatakse nakkus.
    2. Vastuse saamise kiirus. Kui palju analüüsi tehakse? 3-5 tunni pärast saad tulemuse. Tuberkuloosi jaoks ei ole vaja teha röga kultuuri, mis vähendab aega.
    3. Saate tuvastada peidetud nakkuse ja akuutse vormi.
    4. Absoluutseid vastunäidustusi pole. See võimaldab protseduuri läbi viia kõikidele eranditult (isegi väikestele lastele) ja eriti juhul, kui teised meetodid on lahendamata.
    5. PCR diagnostika abil uuritakse erinevaid biomaterjale (uriin, väljaheited, veri, sülg, tserebrospinaalvedelik jne).
    6. Meetod näitab tuberkuloosi varases staadiumis, esimestel tundidel pärast nakatumist.
    sisu ↑

    Puudused

    Lisaks positiivsetele külgedele on ka negatiivsed. See on:

    1. PCR-analüüs on kallis „rõõm”. Lisaks ei ole selle rakendamiseks vajalikud seadmed igas meditsiinikeskuses kättesaadavad. Kliinikutes esineb seda harva, sest ka selle väärtus on suur. Kui me räägime erakliinikutest, siis jah, leiad sellist diagnoosi. Luba ennast, kahjuks, ei saa kõik.
    2. See näitab valepositiivset tulemust inimestel, kes on hiljuti läbinud tuberkuloosiravi.
    3. Kui MBC on muteeritud, võib meetod anda ka valeandmeid.
    4. Kui materjal on valesti kogutud või kui uurimist teostav spetsialist on ebapiisava kvalifikatsioonitasemega, on võimalik ka talitlushäire. Mõnel juhul tuleb protseduuri korrata mitu korda ja iga kord, kui makse korratakse.
    sisu ↑

    Analüüsi ettevalmistamine

    Selleks, et materjal oleks kvaliteetne, peab see olema korrektselt kokku pandud ja selleks korralikult ette valmistatud.

    Tuberkuloosi röga kogumiseks on teatud reeglid. Toimimisalgoritm on järgmine:

    1. Isegi eelõhtul peab õhtul inimene minema köha (kui röga liigub halvasti). Isegi kui see ei aidanud, tuleb sissehingamine läbi viia ravimite lahjendamise ja väljatõmbumise alusel. Röga puudumisel on patsient suunatud bronhoskoopiale. Selle menetluse käigus tehakse uuringu materjal.
    2. Ostu eelnevalt spetsiaalne konteiner. See on steriilne ja õhukindel, nii et seal ei saa midagi täiendavat paigutada ega avada.
    3. Ruum, kus röga kogutakse, peab olema hästi ventileeritud. Akende, uste avamine, kapoti avamine on vajalik. Teine hea võimalus on saada värsket õhku (näiteks rõdule või sisehoovile).
    4. Vahetult enne protseduuri peate kõiki hoiatama, et keegi ei siseneks ruumi, kus kõik juhtub. Biomaterjalis ei tohiks olla täiendavaid mikroosakesi - see on oluline.
    5. Söömine enne korjamist ei ole soovitatav.
    6. Suu ja kurgu loputamine.
    7. Sülg on sülitatud. Selle maht peaks olema minimaalne.
    8. Köhides võtab inimene lima välja ja sülitab selle valmis mahutisse. Pärast protseduuri sulgege kaas tihedalt ja proovi laborisse.

    Kuidas röga koguda, rääkige sellest arstile. Kui patsient ei julge seda ise teha, siis tulevad tervishoiutöötajad päästma. Manipuleerimise ajal panid nad spetsiaalse kaitsva maski. Koguda röga on eriruumis, kus võõrastele pole mingit võimalust. Kui patsient ei saa kliinikusse tulla, tuleb spetsialist oma koju ja aitab lima koguda.

    Kui bronhoskoopia on tehtud, süstitakse patsiendi hingetoru koos bronhoskoopiga. Tema abiga võetakse materjal.

    Usaldusväärsuse huvides on soovitatav analüüs läbi viia kolm korda, nimelt:

    • hommikul tühja kõhuga;
    • pärast esimest korda 4-5 tunni pärast;
    • 24 tundi pärast esimest uuringut ja ka enne sööki.
    sisu ↑

    Kuidas seda analüüsi tehakse?

    Tuberkuloosi röga katse läbimine on ainult osa tööst. Peamine ees. Palju sõltub spetsialisti ettevalmistamisest.

    Uuringu kestus on järgmine:

    1. Spetsialist jätkab DNA esmase struktuuri hävitamist (denaturatsioon). Siin on kaks ahelat. Kõrgetel temperatuuridel eraldatakse need.
    2. Järgmisel etapil vähendatakse temperatuuri (lõõmutatakse). See on vajalik DNA ahela ühendamiseks praimeriga.
    3. Kolmas etapp on pikenemine. Siin sünteesitakse vajalikud molekulid.
    sisu ↑

    Tulemuste dekodeerimine

    Mycobacterium tuberculosis'e röga poolt PCR-i abil saab tuvastada või mitte. Positiivne tulemus põhineb asjaolul, et Koch on biomaterjalis DNA-ga. See viitab sellele, et inimene on nakatunud. Negatiivse - 98% asjaolust, et subjekt ei ole nakatunud.

    Indikaatoreid saab hinnata järgmiselt:

    • milline patoloogia faas (varjatud või aktiivne);
    • kui palju keha mõjutab;
    • kas valitud ravi on konkreetsel juhul tõhus.

    Pea meeles, et midagi pole põhjalik. Seetõttu võib olla valepositiivne või vale-negatiivne tulemus. Selle õigsuse tagamiseks on soovitatav kasutada muid diagnostilisi protseduure või teostada PCR kaks korda (kolm korda).

    Kulude analüüs erinevates keskustes

    PCR-i röga võib anda erinevatel kliinikutel. Andkem näiteid mitme populaarse Moskva keskuse hinnapoliitikast.

    PCR röga analüüs tuberkuloosi suhtes

    Mycobacterium tuberculosis (tuberkuloos), DNA (PCR), kvaliteetne, röga

    Erilist uuringu ettevalmistust ei ole vaja.

    Katsematerjal: röga

    Tuberkuloos (ladina keeles. Tuberculum - "tubercle") - spetsiifiline inimeste ja loomade nakkushaigus, mis edastatakse peamiselt tilkade kaudu. Infektsiooni oht suureneb HIV / AIDSi, kroonilise neeruhaiguse, diabeedi, raseduse, vananemise, elundite siirdamise ja sellega seotud immuunsupressiivsete ravimite vähenemise tõttu. Peale selle on alla 5-aastased lapsed pärast tuberkuliinikatset ja need, kes puutuvad kokku tuberkuloosiga patsientidega, haigusele vastuvõtlikumad. Kõige haavatavamad rühmad on kodutud, vangid, narkomaanid ja eakad.

    Inimeste ja loomade tuberkuloos põhjustab mitmeid lähedalt seotud mükobakterite liike. Inimestel on kõige levinum tuberkuloosi põhjustaja Mycobacterium tuberculosis.

    Pärast tuberkuloosi põhjustaja tuvastamist on vaja läbi viia uuring mükobakterite tundlikkuse kohta tuberkuloosivastastele ravimitele. See menetlus on väga oluline haiguse piisava ravi määramiseks.

    See analüüs võimaldab määrata mükobakteri tuberkuloosi geneetilise materjali (röga) esinemist. Analüüs aitab kopsu tuberkuloosi diagnoosimisel.

    PCR meetod on polümeraasi ahelreaktsioon, mis võimaldab tuvastada geneetilise materjali olemasolu bioloogilises materjalis.
    Lisateavet PCR meetodi kohta - selle sorte, eeliseid ja rakendusi meditsiinilises diagnostikas.

    Võrdlusväärtused - norm
    (Mycobacterium tuberculosis (tuberkuloos), DNA (PCR), kvalitatiivne, röga)

    Informatsioon indikaatorite kontrollväärtuste ja analüüsis sisalduvate indikaatorite koostise kohta võib sõltuvalt laborist veidi erineda!

    Tavaliselt puudub röga mükobakterite tuberkuloosi DNA.

    341MK, Mycobacterium tuberculosis, DNA määramine (Mycobacterium tuberculosis, DNA) röga, pesud, loputusvedelik

    Tuberkuloosi patogeenide DNA määramine: Mycobacterium kompleks: M. tuberculosis, M. bovis, M. bovis BCG, M. microti, M. africanum röstides, bronhide pesemine, vedeliku vedelik PCR tuvastamisega reaalrežiimis aega.

    Tuberkuloos (ladina keeles. Tuberculum - tubercle) - ühine, sotsiaalselt sõltuv inimese haigus. Nad on haiged ja loomad. Tuberkuloosi tekitaja avastas R. Koch 1882. aastal. Need on happekindlad aeroobsed bakterid (74 liiki) perekonnast mycobacterium, mis on laialt levinud pinnases, vees ja loomades. Inimestel on kõige levinum patogeen Mycobacterium tuberculosis. Teine kõige sagedamini on Mycobacterium bovis. Mõlemad liigid on väga väga vastupidavad paljude keskkonnategurite suhtes ning jäävad elus kehasse väga pikka aega ja võivad põhjustada haigust palju aastaid pärast nakatamist. On väga oluline, et mükobakterite tuberkuloos võib moodustada niinimetatud L-vorme. Kehas püsivad nad tuberkuloosi immuunsuse. Pikka aega võib tuberkuloos tekkida latentselt ja seda võib avastada juhuslikult, kuigi sageli ilmnevad sellised sümptomid nagu nõrkus, väsimus, madal palavik, öine higistamine ja aneemia ja leukopeenia.

    Praegu ähvardab tuberkuloos praegu kogu antimikroobse ravi saavutustest hoolimata rahva tulevikku. Seetõttu on kõik diagnostilised meetodid, eriti selle varjatud vormid, äärmiselt olulised.

    Tuberkuloosi laboratoorseks diagnoosimiseks on palju meetodeid: mustri mikroskoopiat (seda kasutatakse kõige sagedamini selleks röstimiseks), klassikalist kultuuri meetodit, ELISA. Neil kõigil on eeliseid, aga ka teatud puudusi, eriti mükobakterite avastamist ainult piisava arvu nende puhul.

    Viimastel aastatel on diagnoosimisel kasutatud polümeraasi ahelreaktsiooni (PCR). Selle kõrge tundlikkus võimaldab uurida uuritavas materjalis üksikuid rakke ja isegi DNA fragmente. Meetod kõrvaldab ristreaktsioonid ja spetsiifilisus ulatub 100% -ni. PCR võimaldab diferentseerida tuberkuloosi piiratud ja levinud vorme, eriti lastel, isegi mikrobioloogiliste uuringute negatiivsete tulemustega.

    Analüütilised näitajad:

    • mükobakteriaalse DNA detekteeritav fragment-spetsiifiline osa;
    • määramise spetsiifilisus - 100%;
    • avastamise tundlikkus - 100 koopiat mükobakteriaalsest DNA-st proovis.
    • Bronhiit, bronhopneumoonia, millele lisanduvad basaalsete lümfisõlmede järsk tõus.
    • Hemoptüüs ühise asteenilise seisundi taustal.
    • Ülemiste ja alumiste hingamisteede äge põletik, millega kaasneb produktiivne köha pikaajalise kokkupuute korral tuberkuloosiga patsiendiga

    Uurimistulemuste tõlgendamine sisaldab teavet raviarstile ja ei ole diagnoos. Selles jaos esitatud teavet ei saa kasutada enesediagnoosimiseks ja enesehoolduseks. Arst teeb täpse diagnoosi, kasutades nii selle uuringu tulemusi kui ka muudest allikatest vajalikku teavet: anamnees, teiste uuringute tulemused jne.

    Katse kvaliteet. Tulemuseks on "avastatud" või "ei avastatud".

    „Avastatud”: analüüsitavas proovis leiti mükobakterite suhtes spetsiifilised mükobakteri-spetsiifilised DNA fragmendid.

    „Ei tuvastatud”: analüüsitud proovis ei leitud mükobakterite suhtes spetsiifilisi DNA fragmente või patogeeni kontsentratsiooni proovis allpool testi tundlikkuse piiri.

    Pöörake tähelepanu, PCR-uuringute ajastamist saab suurendada kinnitavate testide läbiviimisel.

    1. Makarevich A.E. Hingamisteede haigused - M. Kõrgkool, 2000. - 368 lk.
    2. Jacobs D. et al. Laboratoorsete katsete käsiraamat / Lexi-Comp./2002 - lk. 828 - 829.
    • Üldine teave

    * Määratud ajavahemik ei sisalda biomaterjali võtmise päeva

    Röga, tampoonid, loputusvedelik

    Reaalaja PCR tuvastamine.

    Selles peatükis saate teada, kui palju maksab selle uuringu lõpetamine oma linnas, vaadake testi kirjeldust ja tulemuste tõlgendamise tabelit. Kui valida Moskva ja teiste Venemaa linnade „Mycobacterium tuberculosis'e, DNA määramise (Mycobacterium tuberculosis, DNA) määramine röga, pesemise, vedeliku vedeliku” analüüsi, ärge unustage, et analüüsi hind, biomaterjalide võtmise kulud, uuringute meetodid ja ajastus Piirkondlikud meditsiiniasutused võivad erineda.

    Tuberkuloosi röga testimise meetodid

    Tuberkuloosi röga analüüs sisaldub diagnostikameetmete kogumis, mis on vajalik diagnoosi tuvastamiseks ja selgitamiseks. Röga sisaldus aitab luua pädeva raviskeemi.

    Kuidas läbida tuberkuloosi röga test

    Arstid on välja töötanud reeglid analüüsi tegemiseks. Sülg kogutakse hommikul, enne kui isik on hommikusööki saanud. Esiteks täidab patsient hügieeniprotseduure:

    • hambaemailide puhastamine;
    • põhjalik loputamine suuõõne ja neelu puhta veega.

    Seejärel algab analüüsimiseks materjali kohene tarnimine. Kuidas läbida röga test? Menetluse nõuded:

    1. Ettevalmistus algab õhtul ette. Patsienti julgustatakse võtma spetsiaalseid ravimeid, mis muudavad pulmonaalse sekretsiooni loomulikumaks. Need on röstimis- ja harvendusühendid. Kui sellised protseduurid ei aita, teostage inhaleerimine ravimkompositsiooniga, mis on ette nähtud röstimiseks.
    2. Valmistage röga mahutid. Lima tuleb koguda steriliseeritud nõudesse, sulgedes tihedalt, tihedalt.
    3. Enne kohaletoimetamist köha ja sülita mahutisse. Sülje maht ei tohiks olla suur, see nõuab kõri välja röga. Suuõõne bakterid on analüüsis kõrvalised.
    4. Koguda sülg suurepärase ventilatsiooniga ruumis. Analüüs viiakse läbi avausega, avades kapuutsi. Soovitatav on aknad avada või värske õhu kätte minna.

    Menetluse ajal on toas keelatud siseneda. Välised isikud võivad kaasa aidata büroo mikrofloorale ja seega röga, patoloogiliste vormide juurde. Meditsiinitöötajad saavad analüüsi spetsiaalse maskiga (respiraator).

    Tuberkuloosi transkripti röga analüüs

    Dekodeerimine algab lima välimuse vaatamisega. Patoloogia iseloomustab värvimuutust - see muutub tumedaks, nähtavate veresegudega. Värv ei ole peamine näitaja. Pähkel muutub tumedaks punase veini joomist, kohvi kirg. Mõned ravimid ja värvilised joogid muudavad lima välimust.

    Kogutud materjali dešifreerib kaks näitajat, st arstid saavad kaks tulemust:

    Positiivne vastus

    Saadud röga analüüs kinnitab haiguse esinemist organismis. Mis kinnitab seda:

    • võõrkehad või tundmatud lisandid;
    • limaskestade esinemine;
    • nähtavad triibud;
    • ebameeldiv mädane või nakkuslik lõhn;
    • mäda.

    Makroskoopiline uurimismeetod pakub muid andmeid:

    • fibriinsed konvulsioonid;
    • Kochi läätsepleki kihid;
    • bakterite lagunemisest tulenevad tooted;
    • kopsukoe patoloogilise protsessi jäänused.

    Positiivne tulemus näitab valguühendite suurenenud kogust. See jõuab 100-120 g / l.

    Teine mikroskoopiline meetod võimaldab tuvastada teisi ohtlikke elemente:

    • alveolaarsed makrofaagid;
    • leukotsüütide ülehindamine;
    • lümfotsüütide kõrge sisaldus.

    Tuberkuloosi puhul püüab inimene sageli suust välja sülitada. Hemoptüüs suurendab punaste vereliblede moodustumist. Sülje maht suus on selline, et inimene ei suuda seda ilma märkamata neelata. See on rohkem kui tervislikus seisundis.

    Negatiivne vastus

    Uuring näitab, et leukotsüütide arv on väike, vastab normile. Mikrobaktereid ei avastata. Kui patsient ei tunne end tervena, määrab spetsialist täiendava uuringu. On võimalik, et haigus on seotud kopsuhaigusega. Täiendava diagnostika tüübid ja meetodid sõltuvad patsiendi sümptomitest ja seisundist.

    Kuidas on lima uuring

    Tuberkuloos on kopsukoele ohtlik patoloogiline toime, täheldatakse nende lagunemist. Analüüs viiakse läbi mitme meetodi abil. Kõige tavalisem - ELISA (immunoanalüüs). Meetodi olemus:

    1. Antikehad lisatakse lahusele, kuhu on paigutatud röga osa.
    2. Kontrollige antigeenide kontsentratsiooni võrreldes terve keha normiga.
    3. Määrake patoloogilise keskkonna aktiivsus.
    4. Diagnoosige.

    Laboriuuringute teine ​​versioon on JÄÄTMED. Meetodi jaoks võtke spetsiaalne meditsiinitehnika. Riistvara uurimise olemus:

    1. Röga süstitavas mikrokeskkonnas ettenähtud infektsiooni tüübi jaoks.
    2. Seade hakkab kasvama teatud temperatuuri tüvedes.
    3. Protsessis tekib süsinikdioksiid ja andurid võtavad selle vastu.
    4. Gaas ühendab värvi.
    5. Fluorestsentsindeksi kohta tehakse järeldused haiguse tüübi kohta.

    Lihtsaim viis on kultuuriline. Flegm külvatakse spetsiaalses keskkonnas. Arst uurib mikroobide moodustumise kolooniate liike. Meetod on pikim, kuid võimaldab teil diagnoosi tõestada. Seda kasutatakse väga harva, just pika aja jooksul, mis ei ole alati patsiendile sobiv.

    Tuberkuloosi röga PCR analüüs

    PCR on meditsiinilise termini polümeraasi ahelreaktsiooni lühend. Diagnostika on teadlaste üks viimaseid arenguid. See avati 1983. aastal, avastamise tähtsust hinnatakse maailmas, teadlane sai kõrgeima tunnustuse - Nobeli preemia.

    Meetod põhineb geenitehnoloogia kasutamisel. Selle mitmekülgsus väikeses koguses materjali täpseks diagnoosimiseks. Tuvastage tuberkuloosi nakatumine on tõesti nakatumise algusaegadel, ilma haiguse tekkimist ootamata.

    Polümeraasi meetodi olemus:

    • patsient võtab DNA osakeste fragmenti;
    • teostada materjali bioloogilist sünteesi;
    • määratakse mikroorganismide klassi järgi.

    Protsess on tehnoloogiliselt keeruline, see hõlmab molekulaarset geneetilist uurimist. Tuberkuloosi PCR võtab sõna-sõnalt paar tundi. Teiste meetodite jaoks vajalikku aega ei saa temaga kiirelt võrrelda. Pärast analüüsi läbimist ootab patsient haigustekitaja avastamist. Mõista saab ainult spetsialisti aluseks olevat protsessi. Tavaline inimene ei mõista meetodi keerukust.

    Kuidas on tuberkuloosi testide diagnoos:

    1. Tehke analüüsiks vajalik materjal. Mis see võiks olla: veri, kõht, röga, vesi, pesta bronhidega.
    2. Materjali tüüp valitakse sõltuvalt patogeeni võimaliku nakkuse tüübist.
    3. Järgmine samm on ahelaühenduse uurimine. Kaks ahelat läbivad kõrge temperatuuri kuni 98 kraadi. Etappi nimetatakse denaturatsiooniks (struktuurse DNA ahela hävitamine). Temperatuuri säriaeg - kuni 2 minutit.
    4. Järgmine etapp on lõõmutamine. Temperatuuri vähendatakse, praimeril lubatakse ühenduda DNA ahelaga.
    5. Selle tulemusena tekib pikenemine - protsessi jaoks vajalike molekulide süntees.

    Sellise analüüsi jaoks on vaja spetsiaalset varustust. See on kallis, nii et see ei ole üheski tervishoiuasutuses kättesaadav. PCR viiakse läbi rasketel juhtudel, kui tavapäraste diagnostikameetodite täpset tulemust ei ole, ei ole võimalik läbi viia instrumentaalseid meetodeid patsiendi seisundi kontrollimiseks.

    PCR tehnoloogia eelised:

    1. Tulemuse saavutamise kiirus. Umbes 5 tundi on arstil täpsed andmed. See kiirus võimaldab teil patsienti hädaolukorras aidata. Sagedamini on see preoperatiivne periood.
    2. Lubatud, kui teisi meetodeid ei saa kasutada. Näiteks viib röntgenikiirte sagedane kordamine kiirgusele. PCR ei ole patsiendile ohtlik.
    3. Võite uurida mis tahes bioloogilist keskkonda. On tuvastatud isegi keerulised tuberkuloosi vormid.
    4. Seega on meetod turvaline lastele.
    5. Nakkus tuvastatakse igal etapil.
    6. PCR ei võimalda varjata isegi väikest arvu baktereid.
    7. Sobib tuberkuloosi võimaliku kordumise kontrollimiseks.

    Kui palju tuberkuloosi röga analüüs

    Proovid võetakse rohkem kui üks kord. Kordused välistavad vigade võimalikkuse või halva kvaliteediga materjali saamise, mis ei kajasta patsiendi tegelikku asendit ja seisundit. Kui mitu korda röga koguda, rääkige sellest arstile. Parim valik on kolm korda päevas. Mõnikord võib vaja minna täiendavaid proove. Mis aja jooksul nad koguvad:

    1. Enne söömist hommikul.
    2. 3-4 tundi pärast esimest katset.
    3. Teisel päeval, ka enne sööki.

    Tuberkuloos on ohtlik haigus, mis võib mõjutada iga inimese keha. On palju infektsiooni olukordi. Kui teil on kahtlus nakkuse võimalikkuse suhtes, ärge oodake eredaid sümptomeid. Ravi alustamiseks tuleb seda testida, uurida ja aega.

    Tuberkuloosi PCR-diagnoos

    Tuberkuloos on spetsiifiline nakkus, selle fookus võib olla inimkudedes juba aastaid ja seejärel mitme kuu jooksul. See on krooniline haigus, mille optimaalne ravirežiim on raske valida. Selle üheks põhjuseks on hiline diagnoosimine, kui mükobakterid on inimorganismis juba paljude ravimitega kohanenud.

    Millised on kaasaegsed diagnoosimeetodid? PCR diagnostika - mis see on? Kuidas see uurimus tehakse? Millistel juhtudel on selle meetodiga diagnoositud tuberkuloos ja milline on selle olemus?

    Mis on PCR diagnostika

    See on üks kaasaegsemaid meetodeid mitte ainult haiguste, vaid ka bioloogilise materjali avastamiseks. PCR diagnostika leiutati suhteliselt hiljuti. Umbes 30 aastat tagasi 1983. aastal pakkus Ameerika biokeemik Carey Banks Mullis välja ühe lühikese segmendi mikroorganismide bioloogilise materjali kompleksse taastamiskava. Tänu avastusele pälvis teadlane kõrgeima auhinna - Nobeli preemia.

    Mis see on - nakkuste PCR-diagnoos? Polümeraasi ahelreaktsioon (PCR) on viirushaiguste avastamise diagnoos, mis põhineb geenitehnoloogia meetoditel. Seda kasutatakse laialdaselt meditsiinilise mikrobioloogia, immunoloogia ja viroloogia valdkonnas. Meetod on universaalne ja aitab teha diagnoosi väikese koguse materjaliga. Infektsiooni võib sõna otseses mõttes tuvastada esimestel nakatumise tundidel kaua enne haiguse esimeste sümptomite ilmnemist.

    Meetod seisneb haige inimeselt materjali saamises mitte patogeenis, vaid genoomi fragmentides (DNA osakesed), selle biosünteesis ja sellele järgneva määramisega, milline mikroorganismide klass on saadud geneetilise materjali molekulide geneetiliste meetodite abil.

    Hoolimata asjaolust, et see on keeruline protsess, kulub palju vähem aega kui paljud bioloogilised meetodid nakkusetekitajate avastamiseks. Mõne tunni jooksul võib mikroorganismi PCR abil tuvastada. Selleks ei ole vaja seda keskkonnast eraldada (veri, tserebrospinaalvedelik, röga) ja kasvatada seda pikka aega kunstlikel toitainetel. Piisab, et uuritava materjali juures on nakkusetekitaja DNA ahela väike fragment.

    Reaktsiooni aluseks on kunstlikes tingimustes (in vitro) võimalus nakkusetekitaja nukleiinhappemolekulide sünteesi loomiseks.

    Mida on vaja PCRi jaoks?

    1. Krundid on DNA segmendid, millest algab biosüntees või loomine.
    2. Nukleotiidid või komplekssed ühendid, mis on DNA või RNA molekuli aluseks.
    3. Polümeraasi ahelreaktsioon on polümeraasi olemasolu korral võimatu, mis on PCR-i kiirendav ensüüm.

    PCR-diagnostika etapid

    Kuidas toimub molekulaarne diagnoos PCR abil? Menetlus on lihtne ja võtab aega, võttes arvesse materjali kogumist.

    1. Enne uuringu alustamist võtavad nad vajaliku bioloogilise materjali - see on bronhide pesuvesi, veri, mao sisu, röga. Bioloogilise materjali tüüp sõltub kahtlustatavatest patogeenidest.
    2. Kahest ahelast koosneva DNA esmase struktuuri denaturatsioon või hävimine. Selle etapi põhieesmärk on eraldada kaks ahelat kõrge temperatuuri mõjul (maksimum on 98 ° C, mis kestab mitte rohkem kui kaks minutit).
    3. PCR järgmises etapis, mida nimetatakse anniilimiseks, vähendatakse temperatuuri mitu kraadi, nii et praimer seondub DNA ahelaga.
    4. Pikenemine, mille jooksul toimub soovitud molekulide süntees otse.

    Selle tulemusena saavad ainult 25–30 sellist tsüklit vajaliku arvu koopiaid mikroorganismi DNA-st, mida on lihtne ära tunda.

    Kas PCR nõuab tuberkuloosi diagnoosi?

    PCR-i ei ole võimalik teostada absoluutselt kõikidel inimestel, kellel on kahtlustatav tuberkuloos, kuna see meetod nõuab kalleid seadmeid. Mitte kõik avalikud kliinikud ei saa seda endale lubada. Lisaks juhtus nii, et tavalised meetodid nakkuse diagnoosimiseks enamikul juhtudel õigustavad ka ennast.

    Nende hulka kuuluvad:

    • patsiendiuuring, ajaloo võtmine;
    • isiku täielik läbivaatus;
    • Mantoux tuberkuliiniproovi kasutades;
    • radiograafia või fluorograafia;
    • vajadusel arvuti diagnostika;
    • mikrobioloogiliste uuringute meetodid: mustri mikroskoopia ja röga bakterioloogiline uurimine.

    Tuberkuloosi PCR viiakse läbi erijuhtudel, kui on raske diagnoosida või muid instrumentaalseid meetodeid ei ole võimalik teostada.

    Vaatamata diagnostiliste meetodite rohkusele kasvab tuberkuloosi esinemissagedus jätkuvalt. Praegu ei ole mitte ainult kasv, vaid ka muud omadused:

    • haigus esineb sageli raskes vormis;
    • surmaga lõppenud juhtude arv suureneb;
    • haiguse diagnoositud vormid on üha resistentsemad tänapäevase keemiaravi suhtes.

    Inimeste vastumeelsus igal aastal läbi viia tavapäraseid arstlikke läbivaatusi, vaktsineerimise tagasilükkamine viib tuberkuloosi levikuni. Sellistes tingimustes on vaja kiireid, informatiivseid ja tõhusaid uurimismeetodeid, mis peaksid olema kättesaadavad lastele ja täiskasvanutele. Kõik ülaltoodud diagnostikameetodid on palju halvemad kui PCR.

    Tuberkuloosi diagnoosimise eelised PCR-iga

    See uuring, kuigi uus, on end hästi tõestanud, eriti vastuolulistel juhtudel, kus on mitmel põhjusel võimatu diagnoosida.

    Tänu PCR-ile on katsematerjalis tuberkuloosi põhjustaja tuvastamine palju lihtsam.

    PCR-i diagnostika eelised on järgmised.

    1. See on kiire analüüs. DNA molekuli väikest fragmenti saab kasutada vaid mõne tunni (umbes viie) tunni jooksul diagnoosimiseks, mida kasutatakse hädaolukordades edukalt, kui näiteks enne operatsiooni on vaja kindlaks teha, kas inimene on haigestunud tuberkuloosiga.
    2. PCR-analüüs on lubatud juhul, kui teised meetodid ei ole kättesaadavad või keelatud (kopsu tuberkuloosi avastamiseks tuleb mõnikord võtta mitu radiograafilist pilti, mis on suur kiirgusdoos).
    3. PCR abil uuritakse mistahes bioloogilist keskkonda patogeeni olemasolu selles. Näiteks võite teha uuringuid tserebrospinaalvedeliku kohta, kui kahtlustatakse tuberkuloosse meningiidi tekkimist.
    4. Laste nakkushaiguste lubatud PCR-diagnoos, sest meetod on ohutu.
    5. Võimaldab tuvastada patogeeni haiguse mis tahes staadiumis.
    6. PCR kõrge tundlikkus võimaldab tuvastada Mycobacterium tuberculosis, isegi kui bioloogilises materjalis on vaid mõned mikroorganismid.
    7. Haiguse kordumise diagnoosimiseks on hea teha.

    Lõppude lõpuks tundub lugenud PCR peaaegu täiuslik diagnostiline meetod, mis peaks tegema kõikidele tuberkuloosi kahtluse. Kuid siin on ka puudusi, neid tuleb arvesse võtta.

    PCRi puudused tuberkuloosi diagnoosimisel

    Meie aja jooksul on selline diagnostika tavalisest harvem. Ja selleks on põhjus.

    1. See on kallis uurimismeetod. Paljudes kliinikutes puuduvad PCR-i seadmed selle kõrge maksumuse tõttu, kuid analüüse saab veel teha tasulistes laborites.
    2. Vahetult pärast töötlemist võivad inimkehas olla surnud mükobakterid või väikeses koguses elamine (tulemus on positiivne PCR-diagnostika ajal), mistõttu meetod ei ole sel ajal usaldusväärne, seda ei ole mõistlik seda teha.
    3. Mükobakterite mutatsioonid põhjustavad ebaefektiivset PCR-i - normaalset DNA ahela järjestust ei ole võimalik sünteesida.
    4. Uuringu jaoks on vaja valida õige keskkond, verd võetakse ainult siis, kui kahtlustatakse nakatumist (sepsis), närvisüsteemi organite tuberkuloosi korral ei ole vaja rögaid võtta. Sellisel juhul ei suuda PCR patogeeni tuvastada ja diagnoos on informatiivne.

    Indikaatorid tuberkuloosi tuvastamiseks PCR analüüsi abil

    Tuberkuloosi PCR-diagnoosimine toimub kõige sagedamini vastuolulistel juhtudel. Millal suunavad arstid selle uuringu?

    1. Kui diagnoosi on raske teha tavapäraste olemasolevate meetodite abil, kuid tuberkuloosiga patsiendil oli kokkupuude.
    2. Juhul, kui isikut ei saa kliinikusse tuberkuloosi rutiinsete katsete tegemiseks üle anda, on teda kergem uurida PCR-i abil, sest testi röga võib toimuda purki ja diagnoos kinnitatakse mõne tunni jooksul.
    3. Kui inimesel on hädaabioperatsioon ja on hädavajalik teada saada, kas ta on haigestunud tuberkuloosiga.
    4. Vajadusel on rasedatel ka PCR-i abil paremini uurida tuberkuloosi, sest meetod on ohutu.
    5. Tasulisel alusel on igaüks, kellel ei ole diagnoositud tuberkuloosi, kinnitatud bakterioloogiliste meetodite ja fluoroskoopia abil. See juhtub siis, kui kopsudes esinev kahjustus ei ole otseses pildis nähtav ning uuringu jaoks röga väljaandmisel ei suutnud inimene järgida materjali õige kogumise soovitusi. Sel juhul on inimene mures kõikide kopsutuberkuloosile iseloomulike sümptomite pärast.
    6. Kui on kahtlusi Mantoux'i testi tulemuste suhtes.
    7. Lastel on soovitatav teha tuberkuloosi PCR-diagnoos. Protseduur on ohutu, ei tekita täiendavat kiirgusega kokkupuutumist ja on efektiivne haiguse diagnoosimiseks raske.

    Tuberkuloosi õigeaegne diagnoosimine on võtmeks nõuetekohaselt määratud ravile ja haiguse leviku vähendamisele. Sageli ei ole tuttavad haiguse tuvastamise meetodid alati tõhusad. Seetõttu on PCR tänapäeval üks kõige usaldusväärsemaid ja ohutumaid viise nakkuse avastamiseks selle arengu varases staadiumis.

    Mycobacterium tuberculosis, DNA [reaalaja PCR]

    Tuberkuloosi põhjustaja (Mycobacterium tuberculosis) tuvastamise uuring, mille käigus määratakse mükobakterite geneetiline materjal (DNA) biomaterjali proovis, kasutades reaalajas polümeraasi ahelreaktsiooni (RT-PCR) meetodit.

    Vene sünonüümid

    Tuberkuloos, Mycobacterium tuberculosis, Koch pulgad.

    Inglise sünonüümid

    Tuberkuloos, Tubercle bacillus, Kochi bacillus.

    Uurimismeetod

    Reaalajas polümeraasi ahelreaktsioon.

    Millist biomaterjali saab uurimiseks kasutada?

    Venoosne veri, biopsia, emaka endomeetriumi rakud, tserebrospinaalvedelik, urogenitaalsed määrdumised (eesnäärme sekretsiooniga), röga, pleura vedelik, hommikuse uriini esimene osa, ejakulatsioon.

    Kuidas valmistuda uuringuks?

    Koolitust ei nõuta.

    Üldine teave uuringu kohta

    Tuberkuloos (ladina keelest. Tuberculum - "tubercle") - inimeste ja loomade nakkushaigus, mida levitab peamiselt õhu tilgad. Infektsiooni oht suurendab HIV / AIDSi, diabeedi, neeruhaiguse, elundite siirdamise ja immunosupressantide, raseduse, vananemise tõttu põhjustatud immunosupressiooni. Lisaks sellele on kõige vastuvõtlikumad need, kes puutuvad kokku tuberkuloosiga patsientidega, samuti alla 5-aastased lapsed pärast tuberkuliiniproovi. Kõige haavatavamad elanikkonnarühmad on kodutud, vangid, sisserändajad riikidest, kus esineb palju tuberkuloosi, narkomaanid ja eakad.

    Selle uuringu jaoks kasutatakse testisüsteemi, mis põhineb tuberkuloosi põhjustava aine genoomse DNA tuvastamisel reaalajas toimuva polümeraasi ahelreaktsiooni (PCR) abil (reaalajas PCR). Kaasaegses diagnostikas on see üks kiiremaid, mitmekülgsemaid ja väga tundlikke meetodeid.

    Mükobakterite tuberkuloosi avastamise standardmeetodid põhinevad patogeensete mikroorganismide kasvatamisel toitesöötmes. Mycobacterium tuberculosis'e kolooniate madala kasvukiirusega seotud raskused tuleb eeldada kuni 1,5 kuud pärast materjali võtmist.

    Mükobakterite tuberkuloosi geneetilise materjali avastamisel põhinevad molekulaarbioloogilised meetodid on kõrge tundlikkusega ja spetsiifilisusega. Nende kõige olulisem eelis on tulemuste suur kiirus. PCR reaalajas kasutamine võimaldab tuvastada tuberkuloosi põhjustaja kliinilise proovi kättesaamise päeval.

    Baktereemia (patsiendi vereringesse sisenev mükobakter) võib esineda tuberkuloosi nakkuse varases staadiumis, samuti üldise või ekstrapulmonaalse tuberkuloosi tekkimisel. See on ohtlik, sest immuunvastus bakteritele põhjustab sepsist ja septilist šoki, mis on täis surma. Üldise tuberkuloosi tekkimise risk on kõige suurem hilisematel HIV-patsientidel, tuberkuloosivastast ravi katkestanud patsientide seas, samuti nende seas, kes ei ole aja jooksul tuberkuloosi sümptomite tekkeks pöördunud arsti poole.

    Tuberkuloosi diagnoosimine HIV-infektsiooniga inimestel on keha immuunsupressiooni tõttu raske, mis sageli ilmneb tuberkuliinireaktsioonide ja mikrobioloogiliste testide vale-negatiivsetes tulemustes. Sellega seoses on Mycobacterium tuberculosis'e testimine PCR reaalajas väga oluline.

    Milleks teadusuuringuid kasutatakse?

    • Kopsutuberkuloosi diagnoosimiseks (eriti selle üldistatud ja ekstrapulmonaalne, seotud baktereemiaga, vormid) ja jälgides selle ravi.

    Millal on planeeritud uuring?

    • Ekstrapulmonaalse tuberkuloosi kahtluse korral.
    • Baktereemia sümptomitega tuberkuloosi infektsiooni taustal: suurenenud kehatemperatuur, higistamine jne (vähesel arvul baktereid veres võib baktereemia olla asümptomaatiline).
    • Kui patsiendil on pikaajaline kontakt tuberkuloosiga patsiendiga.
    • Lastel on ebanormaalne reaktsioon tuberkuliiniproovile.
    • Kui patsiendil on HIV-infektsioon.

    Mida tähendavad tulemused?

    Võrdlusväärtused: negatiivsed.

    • Patogeeni olemasolu uuritud biomaterjalis. Tavaliselt toimub see ravi vajava aktiivse tuberkuloosi korral. Paljude mükobakterite tuvastamine näitab sageli tuberkuloosi ekstrapulmonaalset vormi või infektsiooni üldistamist.
    • Tuberkuloosi põhjustajat ei leitud. Baktereemia puudub.

    Mis võib tulemust mõjutada?

    Efektiivne tuberkuloosivastane ravi viib aja jooksul mükobakterite kadumiseni kliinilises materjalis.

    Olulised märkused

    Õige ravirežiimi määramiseks, kui patsiendil on diagnoositud tuberkuloos, on vaja läbi viia mükobakterite tundlikkuse test tuberkuloosivastaste ravimite suhtes.

    Samuti soovitatakse

    Kes teeb uuringu?

    Üldarst, terapeut, ftisioloog, uroloog, günekoloog, nakkushaiguste spetsialist.

    Täiendav Artikleid Larüngiit